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DAB染色液的使用方法及注意事項
2025-10-16 DAB染色液用于免疫組化染色，應用在Dako自動染色系統上。DAB染色液的使用方法1.DAB顯色液配制10mMTris-HCl(pH7.6)9mL+DAB(diaminobezidin3，3-二氨基聯苯胺)+0.3%(W/V)NiCl2或CoCl21mL,顯色時加入5-10mL30%H2O2混勻后立即使用2.顯色準備好含有待測蛋白的固相膜：包括電泳、轉印、封阻、一抗（或生物素）處理、辣根過氧化酶（HRP）標記的二抗（或鏈霉親和素）處理、清洗等步驟。3.加入適量的DAB顯色液，...
病理染色——各種組織切片方法如何選擇
2025-10-16 組織學被定義為對細胞和組織的微觀結構（顯微解剖學）的科學研究，其重要組成就是組織的制片和染色觀察。隨著顯微鏡技術和免疫實驗等的發展，組織制片切片技術也得到了廣泛的應用，自常用的石蠟切片、冰凍切片中演化出了碳蠟切片、塑封切片、振動切片和超薄切片等等適用于不同實驗需求的制片方式。今天，小編就來帶大家一起了解一下這些切片方式和它們的應用方向。石蠟切片碳蠟切片塑封切片超薄切片石蠟PEGHMMA、GMA環氧樹脂3-8um3-8um0.5-2um50-80nm組織結構保存良好，能切連續薄...
干貨分享—病理切片技術選擇與應用指南
2025-10-16 病理切片技術全攻略：如何精準選擇石蠟、冰凍、速凍、塑封切片？在科研領域，組織切片技術是揭示生命微觀奧秘的核心工具。無論是基因表達定位、蛋白質互作研究，還是超微結構解析，切片質量直接影響實驗數據的可靠性。然而，面對石蠟切片、冰凍切片、速凍切片、塑封切片等多種技術，科研工作者常陷入選擇困境。本文從科研需求出發，解析四大切片技術的原理、適用場景及操作要點，助你輕松匹配實驗目標！一、技術原理與科研場景解析?石蠟切片：形態學研究的基石技術原理：組織經甲醛固定后，梯度脫水、透明化，石蠟包...
關于菌株
2025-10-13 1、問：斜面低溫保藏法答：將待保藏的菌種接種在合適的斜面培養基上,在相應的條件下培養至得到充足的菌體或者孢子,隨后密封試管置于4攝氏度左右保存,具體保存溫度按照保存菌種設定.保藏時間依微生物的種類從1個月到4個月不等.此法適用范圍廣(細菌、霉菌、放線菌、酵母均適用),操作簡便,成本低廉,復蘇方便,人員能隨時對微生物的狀態進行觀察.缺點是保藏時間較短,需要經常傳代處理,因連續傳代而容易引入基因突變或者雜菌,培養基的理化性質及微生物代謝產物等原因還會導致微生物性狀發生改變.因此斜...
關于PCR，你知道多少？（四） ----幾種特殊的PCR
2025-10-13 1、錨定PCR（anchoredPCR）通常采用的PCR反應必須知道欲擴增的DNA或RNA片段兩側的序列，而在大多數情況下對某些序列本身或其旁側序列并不清楚，“錨定PCR”可以幫助克服序列未知或序列未知帶來的障礙。基本做法是：分離細胞總RNA或者mRNA，在反轉錄酶的作用下合成cDNA，通過DNA末端轉移酶在cDNA3’末端加上poly（dG）尾巴。與此poly（dG）相對應的錨定引物poly（dC）為保證擴增特異性，建議此段旁聚（dC）在十二聚以上，5’端可帶上某些限制酶序...
關于PCR，你知道多少？（三）----Taq DNA聚合酶
2025-10-13 ----TaqDNA聚合酶在PCR反應中，毫無疑問的DNA聚合酶是最關鍵的因素。PCR最初使用的DNA聚合酶是大腸桿菌DNA聚合酶I的Klenow片段。但該酶存在很多缺陷，使之不能廣為應用，比如：熱穩定性差，每次DNA熱變性后大部分酶都被滅活，需要重新加入，每個循環都要重新加入；Klenow酶反應溫度較低，引物和模板容易形成非特異性配對，產生非特異性擴增。后來人們曾使用過T4DNA聚合酶和T7DNA聚合酶，兩者雖使擴增特異性增加，且使DNA合成速度提高了，但是由于其對熱的穩定...
關于PCR，你知道多少？（二）
2025-10-13 ----PCR反應引物設計PCR反應中引物起著很重要的作用。模板的不同、欲擴增的片段不同、需要的片段長度不同或者是用途不同等等，對引物的要求是不一樣的。PCR作為一種體外酶促反應，其效率和特異性主要取決于兩個方面，一是引物和模板結合的特異性，二是多聚酶對引物的有效延伸。引物設計的總原則就是提高擴增的效率和特異性。引物設計的原則一般遵循下列幾項：1、引物的長度以15～30bp為宜。引物過短會使特異性降低，過長則成本增加，而且也會降低特異性。常用的是18-27bp，但不應大于38...
關于PCR，你知道多少？（一）
2025-10-13 PCR的原理多聚酶鏈式反應（polymerasechainreaction）簡稱PCR技術，是近30多年發展起來的一種體外擴增特異性DNA片段的技術，可在數小時之內對僅有幾個拷貝的基因放大千萬倍。那么，PCR的原理是怎樣的呢？PCR技術實際上是在模板DNA、引物以及原料（四種脫氧核糖核苷酸）在適宜的反應條件下，通過DNA聚合酶的酶促反應完成DNA擴增的過程。PCR技術的特異性取決于引物和模板DNA結合的特異性。PCR反應分為三步：1）變性：通過加熱時DNA雙螺旋的氫鍵斷裂，雙...

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