光影智控·膠蹤無隙——照膠儀全流程操作指南與安全要訣
一、核心操作流程與規范
設備準備與校準
環境檢查:確保照膠儀放置在通風、干燥、無塵、無振動的臺面,溫度15-30℃,濕度≤80%。檢查電源線、數據線是否完好,儀器各部件齊全無損壞。
參數預設:根據實驗需求選擇光源類型(如紫外/藍光/白光),設置照射時間、距離、焦距及曝光強度。
校準驗證:使用標準膠片或同位素內標進行校準,確保儀器準確性;定期檢查紫外燈管壽命(如使用壽命≥50000小時),避免衰減影響結果。
樣品處理與放置
電泳后處理:將凝膠從電泳槽取出后,用1×TBE緩沖液清洗表面雜質,避免殘留染料干擾成像。若使用染色,需控制染色時間(如5分鐘),防止過曝。
載膠操作:將凝膠平整鋪在照膠儀載膠板上,確保無氣泡、皺褶,膠孔朝內并居中。用鑷子輕壓排盡氣泡,避免影響成像清晰度。
防護措施:操作時佩戴護目鏡和手套,避免直接接觸紫外光源或染料;若使用化學發光法,需在暗室環境下進行,減少背景干擾。
成像與數據采集
啟動與調整:開啟設備電源,預熱10-15分鐘,啟動配套軟件。通過軟件界面調整焦距、光圈及曝光時間,確保條帶清晰可見。
實時監控:照射過程中觀察樣品變化,避免移動或傾斜載膠板。若采用掃描成像模式,需保持樣品與相機相對靜止;拍照成像則需根據信號強度調整曝光參數(如化學發光需長時間曝光)。
數據保存與分析:成像后保存原始圖像至專用文件夾,使用軟件工具進行條帶分析、定量統計或圖像編輯(如調整對比度、標注泳道)。結果需與標準品或對照組比對,確保準確性。
設備維護與保養
日常清潔:每次使用后關閉設備,用軟質紙或酒精棉擦拭載膠板、鏡頭及紫外燈箱,避免殘留物影響下次實驗。
定期維護:每兩周進行一次全面檢查,包括電源穩定性、軟件兼容性及機械部件磨損情況。更換耗材(如紫外燈管、濾光片)需遵循廠家指南,避免自行拆卸核心部件。
故障處理:若設備出現異常(如異響、圖像模糊),立即停止使用并聯系維修人員。避免自行修理或更改安全裝置,防止二次損壞或安全事故。
二、安全與防護要點
人員防護:操作時穿戴防護裝備(如護目鏡、手套、防靜電服),避免直接暴露于紫外光下。長發需束起,防止卷入設備。
環境安全:保持實驗室通風良好,避免易燃易爆物品靠近加熱設備(如電泳儀、照膠儀)。若使用有毒染料(如EB),需在通風柜中操作并妥善處理廢棄物。
應急處理:遇緊急情況(如漏電、火災),立即切斷電源并啟動應急預案。熟悉設備斷電按鈕位置,確保快速響應。
培訓與考核:操作人員需經過專業培訓并考核合格后方可獨立使用設備,定期參加復訓以更新操作技能和安全知識。